蛋白質(zhì)是生命的基石。它們?cè)诩?xì)胞的功能和結(jié)構(gòu)中起著關(guān)鍵的作用,參與體內(nèi)的運(yùn)輸、通訊和代謝。組成蛋白質(zhì)的有20個(gè)氨基酸,這使得蛋白質(zhì)的潛在結(jié)構(gòu)、序列以及組合幾乎是無限的。
每一個(gè)蛋白質(zhì)特定的功能都取決于它的三維結(jié)構(gòu)。精確地畫出蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)對(duì)于了解他們是如何工作的十分重要,這可以提供蛋白質(zhì)與其他分子相互作用的信息,來了解酶是怎么作用的,以及蛋白質(zhì)如何進(jìn)行構(gòu)象變化。這些數(shù)據(jù)在藥物設(shè)計(jì)以及工業(yè)酶的制造中是十分重要的。
在FTIR中,特定波長(zhǎng)的紅外光照到樣品上被反射或吸收,并進(jìn)行測(cè)量。蛋白質(zhì)的不同結(jié)構(gòu)區(qū)域會(huì)產(chǎn)生不同的特征吸收帶,這些信息可以被解析來確定蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)。這種二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要組成部分是β片層和α螺旋,它是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中重要的一個(gè)方面。
由FTIR得到的酰胺Ⅰ帶提供C=O鍵合的信息,酰胺Ⅱ帶提供N-H鍵合的信息。這可以得到二級(jí)結(jié)構(gòu)的重要信息,因?yàn)榈鞍踪|(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)含量會(huì)影響這兩種鍵合。通常情況下,酰胺Ⅰ帶對(duì)二級(jí)結(jié)構(gòu)非常敏感。
此外,能譜科技iCAN 9傅立葉變換紅外光譜儀還可以得到蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的動(dòng)力學(xué)信息。特定構(gòu)象的結(jié)構(gòu)動(dòng)力學(xué)可以影響蛋白質(zhì)活性,這些動(dòng)力學(xué)對(duì)于蛋白質(zhì)發(fā)揮其功能是*的。
結(jié)構(gòu)動(dòng)力學(xué)信息是通過評(píng)估水與蛋白質(zhì)中氫原子的氫同位素的交換速率得到的。這表明了蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)中N-H鍵中H的可得性;更快的速率表明蛋白質(zhì)區(qū)域正在進(jìn)行的交換活動(dòng)更多更靈活。
能譜科技iCAN 9傅立葉變換紅外光譜儀可以用來研究蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性,包括各種熱作用、化學(xué)條件下的折疊和展開過程以及蛋白質(zhì)聚集過程,這在亨廷頓、帕金森、阿爾茨海默氏癥以及其他淀粉體病中已經(jīng)被廣泛研究。此外,能譜科技iCAN 9傅立葉變換紅外光譜儀還可以提供蛋白質(zhì)側(cè)鏈R基團(tuán)所屬序列的信息,從而區(qū)分多肽鏈中的氨基酸。
雖然FTIR不能像NMR和晶體一樣提供高分辨率的數(shù)據(jù),但是它可以快速有效地掃描天然狀態(tài)的蛋白質(zhì),成本僅是其他方法的一小部分。
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